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紫外分析儀的原理及其應用
日期：2024-10-22 17:35
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摘要：
紫外(wai)分析儀是(shi)(shi)(shi)熒(ying)光(guang)(guang)技術(shu)(shu)的(de)(de)(de)應用，熒(ying)光(guang)(guang)技術(shu)(shu)是(shi)(shi)(shi)什(shen)么(me)呢？ 先了解下什(shen)么(me)是(shi)(shi)(shi)熒(ying)光(guang)(guang)，熒(ying)光(guang)(guang)又作(zuo)“螢光(guang)(guang)”，是(shi)(shi)(shi)指(zhi)種光(guang)(guang)致發(fa)光(guang)(guang)的(de)(de)(de)冷發(fa)光(guang)(guang)現(xian)(xian)象。當(dang)某種常溫物質(zhi)經某種波(bo)(bo)(bo)長(chang)的(de)(de)(de)入(ru)(ru)(ru)射(she)(she)光(guang)(guang)（通常是(shi)(shi)(shi)紫外(wai)線或X射(she)(she)線）照射(she)(she)，吸收(shou)光(guang)(guang)能(neng)后進入(ru)(ru)(ru)激發(fa)態，并(bing)(bing)且立(li)即(ji)退激發(fa)并(bing)(bing)發(fa)出(chu)比入(ru)(ru)(ru)射(she)(she)光(guang)(guang)的(de)(de)(de)的(de)(de)(de)波(bo)(bo)(bo)長(chang)長(chang)的(de)(de)(de)出(chu)射(she)(she)光(guang)(guang)（通常波(bo)(bo)(bo)長(chang)在(zai)可見光(guang)(guang)波(bo)(bo)(bo)段）；而且旦(dan)停止入(ru)(ru)(ru)射(she)(she)光(guang)(guang)，發(fa)光(guang)(guang)現(xian)(xian)象也隨(sui)之立(li)即(ji)消失。具有(you)這種性質(zhi)的(de)(de)(de)出(chu)射(she)(she)光(guang)(guang)就(jiu)被稱之為熒(ying)光(guang)(guang)。 知道了什(shen)么(me)是(shi)(shi)(shi)熒(ying)光(guang)(guang)，顧名思義就(jiu)能(neng)想到什(shen)么(me)是(shi)(shi)(shi)熒(ying)光(guang)(guang)技術(shu)(shu)。熒(ying)光(guang)(guang)技術(shu)(shu)是(shi)(shi)(shi)某些物質(zhi)受定波(bo)(bo)(bo)長(chang)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)激發(fa)后，在(zai)短時間內（10-8秒）會發(fa)射(she)(she)出(chu)波(bo)(bo)(bo)長(chang)大于(yu)激發(fa)波(bo)(bo)(bo)長(chang)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)，這種光(guang)(guang)稱為熒(ying)光(guang)(guang)。這發(fa)光(guang)(guang)現(xian)(xian)象在(zai)各(ge)方面的(de)(de)(de)應用及有(you)關的(de)(de)(de)方法稱為熒(ying)光(guang)(guang)技術(shu)(shu)（fluorescent technique）。
物質(zhi)經(jing)過紫外線照射后(hou)發(fa)(fa)出熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)的(de)(de)現象可分為兩(liang)種(zhong)情況，第種(zhong)是自(zi)發(fa)(fa)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)，如(ru)葉綠素、血紅(hong)素等經(jing)紫外線照射后(hou)，能發(fa)(fa)出紅(hong)色的(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)，稱為自(zi)發(fa)(fa)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)；第種(zhong)是誘發(fa)(fa)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)，即物體經(jing)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)染(ran)料(liao)染(ran)色后(hou)再通過紫外線照射發(fa)(fa)出熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)，稱為誘發(fa)(fa)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)。
以(yi)往人們(men)常(chang)用熒光偏(pian)(pian)振做指標來研究(jiu)生物大分(fen)(fen)子(zi)動力學(xue)。人們(men)趨(qu)于用熒光偏(pian)(pian)振隨時間(jian)(jian)(jian)的(de)(de)(de)衰(shuai)減來研究(jiu)這些問題。在(zai)(zai)這種方法中(zhong)，激發光不是連續的(de)(de)(de)面(mian)偏(pian)(pian)振光，而是偏(pian)(pian)振的(de)(de)(de)光脈沖，因(yin)此(ci)測(ce)得的(de)(de)(de)F∥和(he)F是在(zai)(zai)兩個(ge)不同方向上偏(pian)(pian)振的(de)(de)(de)熒光隨時間(jian)(jian)(jian)的(de)(de)(de)衰(shuai)減，它(ta)既和(he)熒光壽命τ有關，又與(yu)分(fen)(fen)子(zi)在(zai)(zai)溶液中(zhong)的(de)(de)(de)運動有關，因(yin)此(ci)常(chang)表(biao)示為F∥（t）和(he)F⊥（t）。由(you)(you)(you)它(ta)們(men)可得相當重要的(de)(de)(de)物理量——各向異性參數(shu)A（t）。由(you)(you)(you)A（t）可推(tui)測(ce)生物大分(fen)(fen)子(zi)的(de)(de)(de)形狀、分(fen)(fen)子(zi)轉動弛(chi)豫時間(jian)(jian)(jian)（即從個(ge)定(ding)向的(de)(de)(de)狀態到個(ge)無定(ding)向狀態所要的(de)(de)(de)時間(jian)(jian)(jian)），進而可以(yi)推(tui)知生物大分(fen)(fen)子(zi)的(de)(de)(de)大小、分(fen)(fen)子(zi)在(zai)(zai)溶液中(zhong)的(de)(de)(de)轉動角度(du)和(he)時間(jian)(jian)(jian)之間(jian)(jian)(jian)的(de)(de)(de)函(han)數(shu)關系。由(you)(you)(you)這些結(jie)(jie)果可以(yi)研究(jiu)分(fen)(fen)子(zi)之間(jian)(jian)(jian)的(de)(de)(de)相互作用、分(fen)(fen)子(zi)間(jian)(jian)(jian)結(jie)(jie)合的(de)(de)(de)緊密程度(du)、蛋白質、核酸(suan)分(fen)(fen)子(zi)的(de)(de)(de)解聚程度(du)等等。
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