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熒光技術在生物化學及分子生物學研究中應用主要包括以下幾個方面
日期：2024-10-22 23:19
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摘要：
1、物(wu)質的(de)定性(xing)：不(bu)同的(de)熒光(guang)(guang)物(wu)質有不(bu)同的(de)激發光(guang)(guang)譜和發射光(guang)(guang)譜，因此(ci)可用熒光(guang)(guang)進行物(wu)質的(de)鑒別。與(yu)吸(xi)收光(guang)(guang)譜法(fa)相比，熒光(guang)(guang)法(fa)具有更的(de)選擇性(xing)。
2、定(ding)(ding)量(liang)(liang)測定(ding)(ding)：利用(yong)在較低濃度下(xia)熒光強度與樣(yang)品濃度成正比這關系可以(yi)定(ding)(ding)量(liang)(liang)分(fen)析樣(yang)品中熒光組分(fen)的(de)含量(liang)(liang)，常(chang)用(yong)于測定(ding)(ding)氨基酸、蛋白質、核(he)酸的(de)含量(liang)(liang)。熒光定(ding)(ding)量(liang)(liang)測定(ding)(ding)的(de)個點(dian)是靈敏度，例如維生素B2的(de)測定(ding)(ding)限量(liang)(liang)可達1毫(hao)(hao)微(wei)克/毫(hao)(hao)升，這點(dian)使測定(ding)(ding)時所(suo)需(xu)要樣(yang)品量(liang)(liang)大大減(jian)少。 這種定(ding)(ding)量(liang)(liang)測定(ding)(ding)方法(fa)還可應(ying)用(yong)于酶(mei)催(cui)化的(de)反(fan)應(ying)，只(zhi)要反(fan)應(ying)前后有熒光強度的(de)變化，就可用(yong)來(lai)測定(ding)(ding)酶(mei)的(de)含量(liang)(liang)及(ji)酶(mei)反(fan)應(ying)的(de)速(su)率等(deng)。
3、研(yan)(yan)(yan)究生物大(da)分(fen)(fen)子(zi)(zi)的(de)(de)物理化(hua)學特(te)(te)(te)性及其分(fen)(fen)子(zi)(zi)的(de)(de)結構(gou)和(he)構(gou)象(xiang)：熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)的(de)(de)激發光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜、發射光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜、量子(zi)(zi)產率和(he)熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)壽命等參數不僅和(he)分(fen)(fen)子(zi)(zi)內熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)發色(se)基(ji)團的(de)(de)本身結構(gou)有(you)關(guan)，而(er)且還強(qiang)烈地依賴于發色(se)團周圍(wei)的(de)(de)環(huan)境，即對周圍(wei)環(huan)境十分(fen)(fen)敏感(gan)。利(li)用此(ci)特(te)(te)(te)點可通過測定上(shang)述有(you)關(guan)熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)參數的(de)(de)變化(hua)來(lai)研(yan)(yan)(yan)究熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)發色(se)團所在部位的(de)(de)微環(huan)境的(de)(de)特(te)(te)(te)征及其變化(hua)。在此(ci)研(yan)(yan)(yan)究中，除了(le)利(li)用生物大(da)分(fen)(fen)子(zi)(zi)本身具有(you)的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)發色(se)團（如(ru)色(se)氨酸(suan)、酪氨酸(suan)、鳥(niao)苷(gan)酸(suan)等，此(ci)類熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)稱(cheng)為(wei)內源熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)）以外，可將些特(te)(te)(te)殊的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)染(ran)料分(fen)(fen)子(zi)(zi)共(gong)價地結合或(huo)吸(xi)附在生物大(da)分(fen)(fen)子(zi)(zi)的(de)(de)某部位，通過測定該染(ran)料分(fen)(fen)子(zi)(zi)的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)特(te)(te)(te)性變化(hua)來(lai)研(yan)(yan)(yan)究生物大(da)分(fen)(fen)子(zi)(zi)，這種(zhong)染(ran)料分(fen)(fen)子(zi)(zi)被稱(cheng)為(wei)“熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)探(tan)針”，它們發出的(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)般稱(cheng)為(wei)外源熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)。熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)探(tan)針的(de)(de)應用，大(da)大(da)地開拓了(le)熒(ying)(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)技術在分(fen)(fen)子(zi)(zi)生物學中的(de)(de)應用范圍(wei)。
4、利用熒光壽命、量子產率等參數可以研(yan)究生物(wu)大分子中的(de)能量轉移現(xian)象(xiang)：通過該現(xian)象(xiang)的(de)研(yan)究，可以獲得(de)生物(wu)大分子內部的(de)許多信息。
以往人(ren)們(men)常(chang)用熒光偏振(zhen)做指(zhi)標來研究生(sheng)物大(da)分(fen)子動力(li)學(xue)。人(ren)們(men)趨于(yu)用熒光偏振(zhen)隨時(shi)間(jian)(jian)的衰減來研究這(zhe)些問題。由(you)這(zhe)些結果可(ke)以研究分(fen)子之間(jian)(jian)的相互作用、分(fen)子間(jian)(jian)結合的緊密(mi)程度(du)、蛋白(bai)質、核(he)酸分(fen)子的解聚程度(du)等等。
另外(wai)，熒光技術在(zai)**學中亦(yi)有(you)廣(guang)泛的(de)應用。重要(yao)的(de)就是熒光抗體(ti)法。將某些熒光染料與血清抗體(ti)相結合(he)，這(zhe)種標記(ji)的(de)抗體(ti)仍可專(zhuan)地(di)與相應抗原發生結合(he)，形成的(de)復合(he)體(ti)具有(you)熒光特性(xing)，從(cong)而可以確(que)定抗原或抗體(ti)的(de)存在(zai)及其含量(liang)。
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